Το ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού νατρίου χρησιμοποιείται συχνά για απομόνωση RNA, επειδή ελαχιστοποιεί τη βασική υδρόλυση των κλώνων RNA, καθιστώντας το πολύτιμο για τον καθαρισμό mRNA κατά τη διάρκεια γονιδιωματική έρευνα και για τη μελέτη μεταγραφής. Τα ρυθμιστικά με βάση τα κιτρικά βοηθούν επίσης στην ανίχνευση αντιγόνων σε παρασκευάσματα σταθερού ιστού, επειδή σπάζουν τις διασταυρούμενες συνδέσεις που σχηματίζονται μεταξύ των αντιγόνων και του μέσου σταθεροποίησης.
Με τα ακόλουθα εύκολα βήματα, μπορεί κανείς να δημιουργήσει ένα ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού νατρίου με pH 6 (όξινο) σε λιγότερο από 10 λεπτά.
Υλικά για το ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού νατρίου
Απαιτούνται λίγα υλικά για την παρασκευή ρυθμιστικού διαλύματος κιτρικού νατρίου. Με το κιτρικό οξύ, κάποιος χρειάζεται μόνο 1Μ υδροξειδίου του νατρίου, αποσταγμένο νερό και βαθμονομημένο ανιχνευτή pH. Το κιτρικό νάτριο είναι προαιρετικό.
Για την κατασκευή του buffer απαιτείται επίσης ογκομετρικός κύλινδρος 1 λίτρου, ογκομετρική φιάλη 1 λίτρου και τρεις φιάλες μέσων 1 λίτρου. Τέλος, θα χρειαστείτε μαγνητική ράβδο ανάδευσης και μαγνητικό αναδευτήρα. Όλα αυτά τα υλικά μπορούν να βρεθούν στο σχολείο,
εργαστήρια εργαστηρίου ή να αγοραστούν στο διαδίκτυο ή σε καταστήματα ειδικών ειδών.Δύο επιλογές για να κάνετε το Buffer
Υπάρχουν δύο μέθοδοι παρασκευής ρυθμιστικών κιτρικού νατρίου, ανάλογα με τα υλικά που έχετε στη διάθεσή σας.
- Εάν έχετε και το κιτρικό οξύ και τη βάση του συζεύγματος, δημιουργήστε ένα απόθεμα διαλύματος καθενός αναμειγνύοντας 21 γραμμάρια κιτρικού οξέος σε 1 λίτρο απεσταγμένου νερού και 29,4 γραμμάρια κιτρικού νατρίου σε 1 λίτρο αποσταγμένου νερό.
- Εάν έχετε μόνο κιτρικό οξύ, ανακατέψτε 2,1 γραμμάρια σε λιγότερο από 1 λίτρο αποσταγμένου νερού.
Ανάμιξη διαλυμάτων κιτρικού οξέος και κιτρικού νατρίου
Αναμείξτε 82 ml του διαλύματος κιτρικού οξέος με 18 ml του διαλύματος κιτρικού νατρίου. Σε αυτό, προσθέστε αρκετό απεσταγμένο νερό για να μειώσετε τον όγκο του μείγματος σε λιγότερο από 1 λίτρο.
Ρύθμιση του pH
Αναδεύοντας απαλά το διάλυμα με μαγνητικό αναδευτήρα, χρησιμοποιήστε 1Μ υδροξείδιο νατρίου για να ρυθμίσετε το ρΗ του μείγματος στο 6.0. Στη συνέχεια, με μια ογκομετρική φιάλη, προσθέστε περισσότερο αποσταγμένο νερό για να φτάσετε τον τελικό συνολικό όγκο του διαλύματος στο ακριβώς 1 λίτρο.